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使用固相萃取柱遇到這些情況不要慌

更新時間:2022-07-12點擊次數(shù):1230
  固相萃取柱應(yīng)用得到快速發(fā)展,已廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境、制藥等行業(yè),成為樣品前處理凈化的有效手段之一??墒窃谑褂霉滔噍腿⌒≈^程中也會遇到各種各樣的問題。以下是關(guān)于固相萃取柱的常見故障整理,信息網(wǎng)可以幫助到用戶。
 
  一、回收率低
 
  在一次完整的SPE操作中,目標(biāo)化合物可能會存在于樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中,當(dāng)“目標(biāo)物沒有回收或回收率低” 現(xiàn)象發(fā)生時,可向樣品溶液加入標(biāo)液,然后進(jìn)行完整的SPE操作并將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集并分析,首先確定目標(biāo)化合物存在于哪一部分,進(jìn)而確定問題來自下列哪一環(huán)節(jié):
 
  1、目標(biāo)化合物在吸附劑上保留不足;
 
  2、目標(biāo)化合物未被*洗脫;
 
  3、其他環(huán)節(jié)。
 
  1、目標(biāo)化合物在吸附劑上保留不足
 
  當(dāng)超過5%的目標(biāo)化合物出現(xiàn)在樣品流出液或淋洗液時即可斷定“目標(biāo)化合物在吸附劑上的保留不足”。
 
  2、目標(biāo)化合物未被*洗脫
 
  當(dāng)目標(biāo)化合物在樣品溶液流出液和淋洗液中未出現(xiàn)而洗脫液中僅有少量或未出現(xiàn)時,可判斷“目標(biāo)物未被*洗脫”。
 
  3、其他環(huán)節(jié)
 
  如果目標(biāo)化合物在洗脫液中正常出現(xiàn),那么回收率不足的問題應(yīng)該來自樣品前處理的其他環(huán)節(jié)。
 
  二、凈化效果不理想
 
  1、凈化模式的改進(jìn)
 
  通常而言采用保留目標(biāo)化合物的模式比保留雜質(zhì)的模式凈化效果好,如果正在分析的項目為某一種或某一類化合物分析,較好是采用保留目標(biāo)化合物的凈化模式;舉一個簡單的例子,同樣是分析蔬菜中的多菌靈和噻菌靈(一類堿性農(nóng)藥),使用陽離子交換柱可以專一性地保留這些農(nóng)藥,使它們基本與干擾物*分離,而使用正相吸附劑或石墨化炭黑進(jìn)行保留干擾物的操作僅能把主要的干擾物除去,仍有較多干擾物存留。
 
  另外,如果不止一種SPE柱可用于目標(biāo)化合物的凈化時,應(yīng)挑選選擇性好的吸附劑;選擇性方面,離子交換>正相>反相。
 
  2、淋洗液和洗脫液的優(yōu)化
 
  對于反相模式和正相模式,應(yīng)在不影響回收率的前提下,增大淋洗液洗脫的強度并降低洗脫液的洗脫強度。
 
  對于反相模式,可將目標(biāo)化合物的水溶液上樣,然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的甲醇水溶液洗脫,分別收集洗脫液分析,建立淋洗曲線,找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系,淋洗液中甲醇的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲醇的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系;當(dāng)純甲醇不能洗脫目標(biāo)化合物時,應(yīng)試驗甲醇-甲基叔丁基醚混合溶液的洗脫曲線;對于某些既不溶于水也不溶于甲醇的離子型化合物,可以在溶劑體系中加入酸或堿。
 
  對于正相體系,可將目標(biāo)化合物的正己烷溶液上樣,然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的正己烷甲基叔丁基醚溶液洗脫,分別收集洗脫液分析,建立淋洗曲線,找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系,淋洗液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系。
 
  3、對SPE柱進(jìn)行合理的處理
 
  SPE柱中的吸附劑可能存在少量干擾物,有效地活化可以避免這些干擾物進(jìn)入洗脫液,活化溶液應(yīng)選擇整個操作中洗脫強度較強的溶劑體系;在反相模式中,從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%甲醇水溶液,所以活化溶液應(yīng)選純甲醇,當(dāng)目標(biāo)化合物需要用甲醇-甲基叔丁基醚混合液洗脫時,活化溶液應(yīng)選甲基叔丁基醚;在正相模式中,從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%正己烷-甲基叔丁基醚溶液,所以活化溶液應(yīng)選純甲基叔丁基醚。

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